Kaum sind aus den einstigen Gegnern in Guardians of the Galaxy Verbündete geworden, brechen die fünf gemeinsam zu neuen Abenteuern auf. Peter Quill, Gamora, Rocket Raccoon, Groot und Drax der Zerstörer durchstreifen als Weltraumreisende vertraute Schauplätze und bislang unerforschte Regionen der Galaxie. Dabei versuchen sie, die offenen Fragen zu klären, die ihre bisherigen Erlebnisse hinterlassen haben. Besonders Peter Quill, bekannt als „Star-Lord“, steht vor einer überraschenden Erkenntnis: Er ist nicht ausschließlich menschlicher Abstammung. Ohne es zu ahnen, kommt er außerdem einer Begegnung mit seinem Vater immer näher.