Gaylord Focker ist inzwischen Vater von fünfjährigen Zwillingen, die bald eingeschult werden. Doch statt sich in Ruhe auf den großen Schritt vorzubereiten, muss er sich auf den Besuch seiner Schwiegereltern Dina und Jack einstellen. Das Aufeinandertreffen mit Gaylords eigenen Eltern ist ebenfalls vorprogrammiert – schließlich könnten die beiden Familien kaum unterschiedlicher sein.

Besonders Jacks Erziehungstipps bringen Gaylord auf die Palme: Der ehemalige CIA-Agent verfolgt ganz andere Vorstellungen davon, wie man Kinder großzieht. Als dann auch noch Pams liebeskranker Exfreund Kevin unangekündigt auftaucht, gerät die Geburtstagsfeier der Focker-Zwillinge endgültig aus dem Ruder. In Meine Frau, unsere Kinder und ich ist das Familienchaos damit perfekt.