Seit der Superschurke Gru die drei Waisenmädchen Margo, Edith und Agnes adoptiert hat, ist sein Alltag ein völlig anderer. Statt Verbrechen zu planen, liest er Gute-Nacht-Geschichten vor, organisiert Kindergeburtstage und muss sich mit den ersten Verehrern seiner Töchter auseinandersetzen. Doch die neue Familienroutine gerät durcheinander, als Lucy, eine Agentin der geheimen Anti-Villain League, Gru kurzerhand zu deren Hauptquartier bringt. Dort erhält er den Auftrag, die Welt vor einem neuen Bösewicht zu bewahren. Gru stürzt sich in die Ermittlungen und kann dabei wieder auf die Unterstützung von Dr. Nefario und seinen meist tollpatschigen Minions zählen. Doch die Rettung der Welt mit dem Familienleben unter einen Hut zu bringen, erweist sich als schwierig. Zusätzlich bringt Lucys Interesse an ihm den einstigen Einzelgänger gehörig aus dem Konzept.