Archäologe Dr. Henry „Indiana“ Jones erhält von Regierungsagenten den Auftrag, die Bundeslade zu finden – jenes sagenumwobene Behältnis, in dem Moses die Gesetzestafeln aufbewahrt haben soll. Geheime Informationen deuten darauf hin, dass auch die Nazis nach der Lade suchen, denn sie glauben, ihr Besitzer werde dadurch unbesiegbar. Indiana reist nach Nepal, um einen früheren Kollegen aufzuspüren, trifft dort jedoch nur dessen Tochter, die sich ihm anschließt. Ein antikes Schmuckstück führt die beiden nach Ägypten, wo die Nazis unter der Führung von Belloq bereits nach der Lade graben. Ein spannender Wettlauf beginnt: Wer findet zuerst die Quelle der Seelen?